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新鲜冰冻组织空间转录组测序

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Q&A

  技术原理

  当冰冻组织切片放置在带有spatial barcode的Visium 芯片的捕获区域内,进行HE染色和成像后,顺利获得组织透化,细胞内的mRNA释放,被芯片上带有oligo-dT的探针捕获。被捕获的mRNA开始逆转录,得到的cDNA中包含spatial barcode序列,构建文库后顺利获得测序,可以将mRNA转录的序列映射到组织中的原始位置,从而取得基因表达的位置信息。

  Visim空间转录组的核心在于芯片部分:正式文库构建的芯片上有4个捕获区域,每个捕获区域约含有5,000个spot,每个spot能捕获1~10个细胞,spot与spot中心点之间的距离为100μm,每个spot 含有上百万个可以与mRNA结合的捕获探针,且每个探针上含有独一无二的条形码(spatial barcode)来标记空间位置信息。

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空间转录组基因表达芯片原理

 

  样本类型

  可用于组织切片的OCT包埋样本(骨组织等样本不可用)

 

  实验流程

 

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空间转录组测序实验流程

 

分析流程

  空间转录组测序分析流程

 

应用方向

  a.肿瘤异质性;

  b.组织形态学;

  c.组织发育机制;

  d.治疗干预反应;

  e.生物标志物发现;

  f.细胞图谱。

 

  产品优势

  a.全面分析疾病复杂性

  b.发现新的生物标志物,鉴定新的细胞类型和状态

  c.定位细胞图谱的空间结构

  d.识别时空基因表达模式

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